[CRISPR] 유전자 가위 절단 복구 방법 (DNA repair after CRISPR cutting)

https://blog.addgene.org/pitching-mmej-as-an-alternative-route-for-gene-editing

• 원핵생물

1. 유전자가위를 이용하여 유전체를 절단할 경우, NHEJ (Non Homologous End Joining)을 이용하지 못하여 죽음.
2. 대신, Homology-directed repair (HDR)은 가능하여, donor DNA를 넣어주면 Homologous recombination (HR)을 이용하여 살 수 있음. [Shuman and Glickman, 2007]

• 진핵생물

1. 반면, 진핵 생물은 NHEJ를 이용한 자가 복구가 가능함.
2. NHEJ에 의해 복구가 진행하는 동안 유전체 서열의 결실, 추가, 치환이 이루어져 유전자 기능 상실 또는 유전자 기능 교정을 가능케 함.
3. NHEJ는 일반적으로 복구를 하기 위해 microhomology 을 사용하여, 원형과 다른 염기서열로 복구되는 경향이 있음.
4. NHEJ를 할수 없는 상황에서 Microhomology-mediated end joining (MMEJ) 방법을 통해 복구.
5. MMEJ의 경우, microhomology를 기준으로 복구가 된. Double-strand breaks(DSB)의 말단부에 단일가닥상태로 microhomology가 노출되어 있다는 점에서, NHEJ와의 차이를 보임.
6. MMEJ로 복구되는 경우, 양쪽 microhomology 사이에 있는 DNA 서열은 결실됨.